Kādi ir elektroforētiskās apstrādes standarti?

Kādi ir elektroforētiskās apstrādes standarti?

Elektroforēzes pamatprincips ir tāds, ka tas attiecas uz lādētu daļiņu migrācijas procesu elektriskā lauka iedarbībā. Daudzām svarīgām biomolekulām, piemēram, aminoskābēm, peptīdiem, olbaltumvielām, nukleotīdiem, nukleīnskābēm utt., ir jonizējamas grupas, kas var saturēt pozitīvus vai negatīvus lādiņus noteiktā pH vērtībā. Elektriskā lauka iedarbībā šīs uzlādētās molekulas virzīsies uz elektrodu virzienu, kas ir pretējs to lādiņa polaritātei.

Elektroforēzes prasme ir spēja atdalīt, noteikt vai attīrīt paraugus, izmantojot elektrisko lauku, kas liek lādētām molekulām pārvietoties dažādos ātrumos, jo atšķiras dažādu atdalāmā parauga molekulu uzlādētās īpašības, kā arī atšķirības. pašu molekulu lielumā, formā un citās īpašībās. Elektroforēzes process jāveic nesošā vidē. Brīvās saskarnes elektroforēze, ko veica Tiselius et al. 1937. gadā nebija fiksētas nesošās vides, tāpēc dispersija un konvekcija bija salīdzinoši spēcīgas, ietekmējot atdalīšanas efektu. Tātad tas nodrošina elektroforēzi ar fiksētu nesošo vidi, kur paraugs tiek pakļauts elektroforēzes procesam fiksētā vidē, samazinot dispersijas un konvekcijas traucējumus.

Sākotnējie atbalsta materiāli bija filtrpapīrs un celulozes acetāta membrāna, ko pašlaik laboratorijās izmanto retāk. Ilgu laiku mazmolekulāras vielas, piemēram, aminoskābes, peptīdi, cukuri utt., parasti tika atdalītas un analizētas ar elektroforēzi, kā barotni izmantojot filtrpapīru vai celulozes vai silikagela plānslāņa plāksnes. Tomēr pašlaik analīzei parasti tiek izmantotas aktīvākas metodes, piemēram, HPLC. Šie līdzekļi ir piemēroti mazu molekulu vielu atdalīšanai ar vienkāršu un ērtu darbību. Tomēr nesakārtotu biomolekulu atdalīšanas efekts ir salīdzinoši vājš. Gela kā atbalsta barotnes ieviešana ir ievērojami veicinājusi elektroforēzes prasmju attīstību, padarot elektroforēzes prasmes par vienu no svarīgākajām metodēm bioloģisko makromolekulu, piemēram, olbaltumvielu un nukleīnskābju, analīzei.

Elektroforētiskā apstrāde nav grūta, taču mums arī jāzina, ka elektroforētiskajai apstrādei ir noteikti standarti, pretējā gadījumā mēs nezinām, vai kvalitāte ir kvalificēta. Tātad, kādi ir šīs elektroforētiskās apstrādes standarti?

1. Gluda virsma

Tas ir pamatnosacījums, ja virsma nav gluda, tad tiek zaudēta pamatkvalifikācija;

2. Viendabīgs biezums

Elektroforēzes apstrādei ir jānodrošina vienmērīgs biezums, lai novērstu krāsu atšķirību parādīšanos;

3. Nav acīmredzamu plaisu uz virsmas